分析類型
親和性、動力學、濃度檢測、有效濃度檢測、熱動力學、結合計量、結合條件、相互作用機制、常規篩選、配體垂釣、表位測定、環境因素依賴性
應用類型
結合特異性、抗體選擇、藥物發明、配體垂釣、細胞信號傳導、基因調控、親和層析、結構-功能關系、小分子間相互作用
生物傳感器和微射流系統
SensiQ的SPR生物傳感器運用了Texas Instruments公司研發的光學傳感器設計,以及Kretschmann SPR幾何學構建,靈敏度高,光學靜穩。生物傳感器***次性使用,其羧基化表面適合于多種優化鍵合方案。生物傳感器的安裝快捷,幾秒鐘便可完成,使用也非常簡便。功能化的生物傳感器即便在儲存***段時間后仍可繼續使用。
SensiQ的雙通道nL數量***的流動池設計,利于實時的參照曲線減除,并保證分析物在生物傳感器的相互作用表面具有高傳質性(Mass Transport)。***大地降低死體積和樣品散射,對于真實的和量化的動力學和親和性數據的獲取至關重要。耐用的射流設計便于維修,明顯減少了停機時間。
表面等離子共振技術
表面等離子共振(SPR)是***種光學現象,可被用來實時跟蹤在天然狀態下生物分子間的相互作用。這種方法對生物分子無任何損傷,且不需任何標記物。
先將***種生物分子(靶分子)鍵合在生物傳感器表面,再將含有另***種能與靶分子產生相互作用的生物分子(分析物)的溶液注入并流經生物傳感器表面。生物分子間的結合引起生物傳感器表面質量的增加,導致折射指數按同樣的比例增強,生物分子間反應的變化即被觀察到。這種反應用反應單位(RU)來衡量:1 RU = 1pg 蛋白/mm2 = 1 x 10-6 RIU(折射指數單位)。
分析物在被注入的過程中,由對流和擴散流經相互作用表面而與靶分子形成復合物,導致分析物濃度改變。微射流系統內nL數量***流動池的應用,使得這種濃度的改變降至***低點,以確保高傳質系數(Mass Transport Coefficient,km)。為保證分析物的傳質性不被限制,鍵合在生物傳感器表面的靶分子濃度必須較低。當分析物被注入時,分析物-靶分子復合物在生物傳感器表面形成,導致反應增強。而當分析物被注入完畢后,分析物-靶分子復合物解離,導致反應減弱。通過結合式相互作用模型擬合這種反應曲線,動力學常數便可被確定。而非特異性結合和總折射指數移相等效應則可通過參照曲線減除法予以驅除。
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親和分子對
蛋白質–蛋白質、多肽–受體、抗體–抗原、膜受體–配體、凝集素–聚糖/糖蛋白、蛋白質–小分子、蛋白質–核酸、細胞–配體等
實驗設計
任何***對親和分子,***個(靶分子)被鍵合在生物傳感器表面,另***個(分析物)被置于溶液中。當含有分析物的溶液流經靶分子鍵合的生物傳感器表面時,親和性復合物生成。
SensiQ配備雙通道流動注射分析式微射流系統,內有85nL流動池。SensiQ使用***次性的SPR生物傳感器,裝卸簡便。生物傳感器表面包被有單層的羧基化寡聚環氧乙烷(Carboxylated Oligoethyleneoxide)基質,可鍵合多種生物分子,并有效地阻止非特異性結合及變性。靶生物分子的這種既被鍵合在固相生物傳感器表面,又存在于液相中的方式,增進了兩種親和分子間的接觸性,同時避免了由于人為因素所造成的動力學分析的復雜化。
SensiQ備有多種鍵合方案用于改進實驗設計,以支持生物分子的附著。***常用的偶聯方式是用EDC/NHS進行胺偶聯。其它鍵合方式,例如順丁烯二酰亞胺-硫醇(Maleimide-thiol),還原胺化,酰肼-醛(Hydrazide-aldehyde),親和力捕獲等,亦可使用。SensiQ雙通道檢測中的***個通道可用于生成適當的參照曲線。當表面化學物固定好以后,加入***多250 μl的樣品,緩沖液流經生物傳感器表面時產生穩定的基線。樣品注入和計時通過自動化控制完成。通過實驗設置向導功能,用戶可記錄多次注射周期,并具備高重復性。
控制軟件
SensiQ的控制軟件在原始反應曲線生成時,同時并實時獲取和展示兩個通道內的數據。參照通道內的數據被減除,以補償熱漂移、非特異性結合、總折射指數移相等效應,從而得到清晰高質的實驗數據??刂栖浖诜磻€上簡單加入報告點,用來確定樣品注入后產生的結合反應。報告點的添加可在實驗中的任何時候由人工進行,或由程序預設在固定的實驗周期之中。列于表格中的所有報告點,連同相關的事件紀錄,均有案可查。數據文件被儲存后可被控制軟件重新打開并編輯。
SensiQ控制軟件的簡單明了的用戶界面,使得實驗設計和進行高效省時。實驗向導功能簡化設置過程,提高實驗重復性。
QDATTM分析軟件
反應曲線的分析以及其后的動力學和親和性數據測算通常繁瑣費時。SensiQ的QDATTM分析軟件極大地簡化了數據分析過程,為研究人員的動力學和親和性測定提供了簡單、省時、可信的手段。
QDATTM是在Biologic Software公司應用廣泛的Clamp and Scrubber架構之上開發的***新***代分析軟件,可在幾分鐘內成功分析采集到的高質量數據。QDATTM的簡明友好界面帶領用戶通過***系列步驟,幾秒鐘內便完成信息的測算。QDATTM的模型擬合運用數字整合及優化的曲線擬合算法,迅速地估算***佳擬合參數值,確保相互作用模型和數據集的擬合,以測定動力學和親和性常數,以及濃度分析。QDATTM同時提供了簡單殘差圖和殘差標準差,用來定量評估擬合的程度。QDATTM的動力學擬合模型包括準******結合模型(Pseudo-first-order Binding Model)和準******傳質結合模型(Pseudo-first-order Binding Model with Mass Transport)。