L-抗壞血酸（維生素C）測(cè)定試劑盒（酶學(xué)方法）
應(yīng)用于食品，飲料及生物制品檢測(cè)
Cat. No.: E 0409 677 Pack Size: 20 tests
比色方法
此方法用于檢測(cè)水果和蔬菜（如馬鈴薯），水果和蔬菜產(chǎn)品（如西紅柿醬、泡菜、果醬、果汁），嬰兒食品，啤酒，飲料，流食，粉狀和烘烤劑，肉產(chǎn)品，奶制品，葡萄酒，還有動(dòng)物飼料，醫(yī)藥品（如維生素配制、陣痛藥、退燒藥）和生物樣品中的L-抗壞血酸（維生素C），
分析物
L-抗壞血酸不定量的分布于動(dòng)物和植物中。人類不能自身生產(chǎn)L-抗壞血酸，因此必須由外源（vitamin C）提供。***般情況下來(lái)源于水果和蔬菜中，出于技術(shù)原因，L-抗壞血酸曾被用于食品工業(yè)中的抗氧化劑。它是***種相對(duì)敏感的物質(zhì)，L-抗壞血酸的檢測(cè)非常適用于從原始水果和蔬菜中加工食品的質(zhì)量評(píng)定。
L-抗壞血酸用于醫(yī)藥品生產(chǎn)中的組成部分，如維生素產(chǎn)品和陣痛藥，另外，它還用于動(dòng)物飼料添加劑中。
原理
L-抗壞血酸 （x-H2） + MTT+ PMS—> dehydroascorbate （x） + MTT-formazan + H+X
L-抗壞血酸 + ? O2 AAO——> dehydroascorbate + H2OX
特異性
在給定的條件下，此方法特別針對(duì)于L-抗壞血酸。合成的D-阿拉伯抗壞血酸/阿拉伯糖型抗壞血酸能作為抗氧化劑，也能反應(yīng)，但反應(yīng)速度較慢。
靈敏度和反應(yīng)下限
測(cè)定靈敏度為0.005個(gè)吸光度單位，樣品體積為1.600ml，此相當(dāng)于0.1mg/l樣品溶液中的L-抗壞血酸濃度。0.015個(gè)吸光度單位的差異能造成0.3 mg/l檢測(cè)限，樣品體積為1.600 ml.。
線性
測(cè)定的線性范圍為0.5 ugL-抗壞血酸（0.3mgL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為1.600ml）到20 ugL-抗壞血酸（0.2gL-抗壞血酸/l樣品溶液體積為0.100ml）
精密度
在用***個(gè)樣品做重復(fù)實(shí)驗(yàn)時(shí)，可能會(huì)產(chǎn)生0.005-0.010個(gè)吸光度單位的差異。標(biāo)準(zhǔn)的相對(duì)偏差（變異系數(shù)）大約為1-3%。當(dāng)分析檢測(cè)數(shù)據(jù)時(shí)，要考慮到L-抗壞血酸的水溶液穩(wěn)定性較差，尤其是重金屬離子或氧存在時(shí)。
干擾及錯(cuò)誤來(lái)源
糧食的成分不經(jīng)常干擾實(shí)驗(yàn)。高濃度的酒精和D-山梨酸醇能降低反應(yīng)速度，大量的亞硫酸鹽必須通過(guò)添加甲醛來(lái)去除。醋酸抑制酶AAO。金屬和 亞硫酸鹽離子可以導(dǎo)致L-抗壞血酸的自發(fā)分解。
試劑盒包括內(nèi)容
1.磷酸鹽/檸檬酸緩沖液 ———— pH值大約3.5；MTT
2.AAO（坑壞血酸-氧化酶）—— 每板約17 U AAO
3. PMS 溶液
試劑
用于檢測(cè)L-抗壞血酸的試劑從the Hazardous Substances Regulations, the Chemicals Law or EEC Regulation 67/548/EEC and subsequent alteration，supplementation and adaptation guidelines的意義上說(shuō)是無(wú)害的。無(wú)論如何，所有應(yīng)用的化學(xué)試劑的***般安全性應(yīng)該堅(jiān)持下去。用完后，試劑能隨實(shí)驗(yàn)室的廢物處理掉，但有些地方條例有待完善。
樣品制備的***般方法
使用方法：直接用清亮、無(wú)色、中性液體樣品，或稀釋后體積達(dá)1.600ml；
過(guò)濾混濁液；
除去樣品中的二氧化碳（如通過(guò)濾青裝置）
用聚乙烯聚吡咯烷酮（PVPP）處理“重顏色"樣品和更大體積的樣品。
破碎或攪勻的固體或半固體樣品，用偏磷酸萃取或溶解。
用15%w/v的偏磷酸除去樣品中的蛋白質(zhì)。
含有脂肪的樣品用偏磷酸萃取。
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